以賽亞書的內容，大概可分為兩大部分。第一部分（賽一~三十九章）是先知在猶大四王年間，對猶大人所發出的一系列信息，其中以審判和責備較多。第二部分（賽四十~六十六章）是先知鼓勵猶大人面對被擄的現實而發出的信息，其中以拯救和安慰居多。 以賽亞書的第一部分，以一個雙重的引介（賽一1，二1）開始。跟著的內容可以分為三段：

第一段（賽一~十二章）是一整體，背景是在猶大亞哈斯王所面對的危機中，先知的信息包括審判與拯救。有人稱首五章為一本「小型先知書」，¹ 是由一篇法庭控訴辭開始（賽一章），直到著名的「葡萄園之歌」（賽五章）。第五章一連串的「禍哉」（賽五8、11、18、21~22），一方面引出先知自覺污穢的「禍哉」（賽六5），另一方面又與十章1及5節的「禍哉」相呼應。因此，第五章的七個「禍哉」（賽五8~24，十1~4）就好像把六章1節至九章6節這一段「環框」著。² 故此，有人認為第六章並不是先知的蒙召，而是他被差去作一個特殊的任務。這任務就是警告預備投靠亞述去對抗以色列和亞蘭聯軍的亞哈斯（賽七~八章），³ 又指責以色列和亞蘭聯軍（賽九~十章），並應許大衛家將有另一未來的國（賽十一章），而上帝也將收回祂的怒氣（賽十二章）。

第二段（賽十三~二十七章）是先知向列國所發出審判的預言。起先只是針對巴比倫、摩押、亞蘭、埃及等國，但到了第二十四章，先知預言的範圍擴大到世界。其後（賽二十五~二十七章），先知的信息轉為對列國將來的救贖，故有人稱第二十四至二十七章為「以賽亞的啟示卷」（Isaiah Apocalypse）。⁴

第三段（賽二十八~三十九章）是歷史插段，先知在猶大王希西家面對亞述大軍圍城（賽三十六~三十七章）和他病到幾乎要死（賽三十八章）的危機時，說出審判與勉勵的話。跟第一段一樣，此段也以一連串的「禍哉」開始（賽二十八~三十三章），針對的是以色列（以法蓮，賽二十八章）、猶大（耶路撒冷或亞利伊勒，二十九章）、任何倡議倚賴埃及的人（賽三十~三十一章）和猶大的敵人（賽三十三章）。插在這些篇章之間（賽三十二，三十四~三十五章），是上帝要重建其子民的應許。以賽亞書第三十六至三十九章，在時序上應在第二十八至三十五章之前，但現在是放在之後，原因可能是三十八章6節的一句「後語」（anachronism），正好作為四十章的引言。以賽亞書第三十六至三十九章與列王紀下十八章13節至二十章19節完全相同。⁵本段落的最後部分，是描述希西家王因向巴比倫顯軍備（賽三十九章）而受責。

以賽亞書的第二部分，以一句給耶路撒冷的安慰話（賽四十1）作開始，好像是回應一章8至9節那個被圍困（但沒有被毀）的城。一章4節提到罪孽（guilt）和行惡（transgression），而四十章2節指出罪孽（guilt）和罪（transgression）已被赦免，由此可見，第二部分和第一部分是有關係的。⁶ 第二部分的內容也可分為三個段落：

第一段（賽四十~四十八章）預言上帝子民將從被擄之地拯救過來。拯救的目的是以色列人（四十四章）和全地的人都要認識真神（四十五章）。

第二段（賽四十九~五十九章）預言上帝子民將從罪惡中被受苦的神僕拯救。這段落的三首神僕詩，連同前段的一首，清楚交代要來的拯救者的蒙召（賽四十二1~9）、被差（賽四十九1~13）、委身（賽五十4~11）和事工（賽五十二13~五十三12）。

第三段（賽六十~六十六章）預言上帝子民將被彌賽亞拯救，並將來在榮耀裡。在這個段落，作者除形容將要來的國度和說明有誰能進這國度之外，還呼籲猶大餘民和列國的人悔改歸向上帝，共同進入這國度。